产品货号：
BTN11-180402
中文名称：
大豆源性成分荧光PCR检测试剂盒(探针法)
英文名称：
Soy Endogenous qPCR Kit（Probe Method）
产品规格：
50次
发货周期：
1～3天
产品价格：
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大豆是常见的农作物，很多时候需要通过检测大豆专一性内源基因的存在来判断某些食品中是否含有大豆成分或添加剂。本产品即是基于基因荧光探针PCR法的大豆Lectin基因的快速检测试剂盒，适用于样品中大豆源性成分的快速检测。
产品特点：
1. 灵敏度高，分析灵敏度可以达到50拷贝/uL，远高于常规方法，也比常规的PCR检测高100倍。
2. 特异性高，根据大豆Lectin基因的保守区设计引物，不会误检。
3. 一管封闭式，避免了PCR产物对后续PCR的污染。
4. 线性范围广，在10-107拷贝/uL的靶分子浓度范围内均呈线性。
5. 简单快捷，只需要2小时即可得到实验结果。
产品组成：
保存条件：-20℃保存，有效期一年。
自备试剂：样品等
使用方法：
一、样品DNA的制备
用自选方法纯化需要检测样品的DNA，也可以另购本公司的柱式植物DNA提取试剂盒（BTN60602），跟本试剂盒兼容。
二、制备Lectin阳性片段的不同稀释样品（以制备10-10E6这6个10倍稀释度为例。先将对照从10E10稀释到10E7 拷贝/uL。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。
1. 标记6个离心管，分别为1,2,3,4,5和6号。
2. 用带芯分别加入45μl超纯水（最好用带芯枪头，下同）
3. 在6号管中加入5μl 浓度为10E7的Lectin阳性片段，充分震荡1分钟。
4. 换枪头，从6号管中取5μl溶液到5号管中，充分震荡1分钟。
5. 换枪头，从5号管中取5μl溶液到4号管中，重复上面的操作直到得到6个稀释度的样品。1-6号管中阳性对照片段的浓度分别为10E1到10E6拷贝/uL。
6. 从6个管中分别取5μl进行定量PCR（见下步），每个样品最好重复3次。
三、荧光定量PCR反应（30μl体系）
在PCR管中加入下列成分（每个样品最好重复三次，这里只列出一次）：
轻柔混匀后上机，按下面参数进行定量PCR，反应参数如下：
注意：仪器将检测扩增产物与探针杂交所产生的荧光信号，获取数据。
荧光通道选择：检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，请勿选择 ROX 参比荧光。
四、数据处理：
以阳性对照浓度的log值为横轴，以Ct值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的log为横轴，以Ct值为纵轴，通过待测样品的Ct值计算出样品DNA的浓度。
相关搜索：大豆源性成分荧光PCR检测试剂盒(探针法)，Soy Endogenous qPCR Kit（Probe Method）
产品特点：
1. 灵敏度高，分析灵敏度可以达到50拷贝/uL，远高于常规方法，也比常规的PCR检测高100倍。
2. 特异性高，根据大豆Lectin基因的保守区设计引物，不会误检。
3. 一管封闭式，避免了PCR产物对后续PCR的污染。
4. 线性范围广，在10-107拷贝/uL的靶分子浓度范围内均呈线性。
5. 简单快捷，只需要2小时即可得到实验结果。
产品组成：
| 组分 | 编号 | 规格(50T) |
| 即用型qPCR Mix，2× | BTN90408 | 750μl |
| Lectin专一性引物对（25uM each） | Yw14271428 | 100μl |
| Lectin阳性对照片段（10E10拷贝/uL） | Yw14291430 | 10μl |
| Lectin专用探针（5.4nM，5FAM-3HBQ1） | T11-180402 | 25μl（棕色） |
| 超纯水 | BTN100935 | 1mL |
保存条件：-20℃保存，有效期一年。
自备试剂：样品等
使用方法：
一、样品DNA的制备
用自选方法纯化需要检测样品的DNA，也可以另购本公司的柱式植物DNA提取试剂盒（BTN60602），跟本试剂盒兼容。
二、制备Lectin阳性片段的不同稀释样品（以制备10-10E6这6个10倍稀释度为例。先将对照从10E10稀释到10E7 拷贝/uL。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。
1. 标记6个离心管，分别为1,2,3,4,5和6号。
2. 用带芯分别加入45μl超纯水（最好用带芯枪头，下同）
3. 在6号管中加入5μl 浓度为10E7的Lectin阳性片段，充分震荡1分钟。
4. 换枪头，从6号管中取5μl溶液到5号管中，充分震荡1分钟。
5. 换枪头，从5号管中取5μl溶液到4号管中，重复上面的操作直到得到6个稀释度的样品。1-6号管中阳性对照片段的浓度分别为10E1到10E6拷贝/uL。
6. 从6个管中分别取5μl进行定量PCR（见下步），每个样品最好重复3次。
三、荧光定量PCR反应（30μl体系）
在PCR管中加入下列成分（每个样品最好重复三次，这里只列出一次）：
| 成份 | 样品 | 6个阳性对照 稀释梯度 | 阴性对照 |
| Lectin专一性引物对 | 2μl | 2μl | 2μl |
| Lectin专一性探针 | 0.5uL | 0.5uL | 0.5uL |
| 样品DNA（自备） | 5μl | 无 | 无 |
| Lectin阳性对照 | 无 | 5μl（每个管加一 个稀释度的对照） | 无 |
| 补超纯水到 | 15μl | ||
| 即用型荧光PCR Mix | 15 μL | 15μl | 15μl |
轻柔混匀后上机，按下面参数进行定量PCR，反应参数如下：
| 过程 | 温度 | 时间 | 说明 |
| 预变性 | 94℃ | 2分钟 | |
| PCR反应 (40个循环) | 94℃ | 15s | |
| 60℃ | 15s | ||
| 72℃ | 35s | 采集数据 |
注意：仪器将检测扩增产物与探针杂交所产生的荧光信号，获取数据。
荧光通道选择：检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，请勿选择 ROX 参比荧光。
四、数据处理：
以阳性对照浓度的log值为横轴，以Ct值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的log为横轴，以Ct值为纵轴，通过待测样品的Ct值计算出样品DNA的浓度。
相关搜索：大豆源性成分荧光PCR检测试剂盒(探针法)，Soy Endogenous qPCR Kit（Probe Method）